E.3.1.2酒石酸锑钾溶液（3.0g/L）：在约800ml纯水中溶解3.00g半水合酒石酸锑钾[K（SbO）C4H4O6C·1/2H2O]，或溶解3.22g三水合酒石酸锑钾[K（SbO）C4H4O6C·3H2O]稀释到1000ml，棕色瓶中冷藏储存，可稳定约3个月。
E.3.1.3抗坏血酸溶液：在约700ml纯水中溶解60.0g抗坏血酸（C6H6O6）并稀释到1L。加入1.0g十二烷基硫酸钠[CH3（CH2）11OSO3Na]。在加入十二烷基硫酸钠前脱气。每周制备，颜色变黄弃用。
E.3.1.4钼酸盐显色剂：在1L体积的容量瓶中，加入约500ml去离子水，缓慢加入35.0ml浓硫酸（注意：溶液会发热），摇晃混合，然后加入213ml钼酸铵溶液（E.3.1.1）和72ml酒石酸锑钾溶液（E.3.1.2），稀释到1L，混匀，用超声波设备脱气。可在室温下保存，颜色蓝弃用。
E.3.2活性磷酸盐标准溶液
E.3.2.1活性磷酸盐贮备液：称取0.439g磷酸二氢钾（KH2PO4，105℃烘1h），溶解于纯水中并准确定容至1L（1.00ml=0.100mgP）。在冰箱保存稳定期约为3个月。
E.3.2.2活性磷酸盐使用液：移取1.00ml活性磷酸盐贮备液（E.3.2.1）用纯水准确稀释到100ml（1.0ml=1.000μgP）。放置于冰箱，每周重配。
E.3.2.3标准曲线系列溶液：移取适量的活性磷酸盐使用液（E.3.2.2）于纯水中，配制一系列的标准曲线溶液。临用时配制。样品浓度应落于标准曲线的溶度范围之内。曲线浓度范围不超过两个数量级。曲线至少应包括五个逐级递增的不同浓度点。
E.4仪器及设备
E.4.1连续流动自动分析系统
E.4.1.1取样器；
E.4.1.2单通道或多通道比例进样泵；
E.4.1.3反应单元和模块；
E.4.1.4比色检测器；29
E.4.1.5加热单元；
E.4.1.6计算机数据处理系统
E.4.2其他材料与设备
E.4.2.1无磷的玻璃器皿和聚乙烯瓶。
E.4.2.2孔径为0.45μm的薄膜过滤器。
E.5校准与标准化
E.5.1配制至少含五个点的标准系列用于校准（E.3.2.3）。
E.5.2每60个样品需测量一组标准曲线系列样品。
E.5.3以平行测定两次的方式先分析标准曲线系列的各标准点，后分析实际样品。
E.5.4标准曲线至少包含五个点，曲线相关性系数r应等于或大于0.995，曲线浓度范围不能超过两个数量级。
E.6分析步骤
E.6.1冰冻样品应先在室温下解冻。
E.6.2调整分析流程并设置特性参数（管路、流速、进样量等参考仪器分析系统）。
E.6.3准备所有试剂和标准溶液。
E.6.4开机预热30min。泵入去离子水通过所有试剂管路，检查管路是否泄漏，达到纯水基线稳定。泵入相应试剂到进样管道，达到试剂基线稳定。
E.6.5设定光度计波长为880nm，设定好合适的比色计量程。
E.6.6使用干净的样品杯，把标准曲线溶液、试剂空白、空白加标样、实验室基体加标样、质控样、待测样品分别放在取样架上，在每10个样品间放置一个空白。
E.6.7开始分析测试。
E.6.8分析结束后，泵入纯水清洗所有试剂管路。
E.7数据计算
E.7.1磷质量浓度的计算通过标准曲线的回归方程求得，其中标准系列点的浓度为自变量，相关的响应峰值为因变量。
E.7.2测量结果应处于标准曲线的最高点和最低点之间时，当水样的测定结果超过最高点时，应执行稀释并重测。
E.7.3结果以mgP/L或μgP/L表示。
E.8注意事项
E.8.1样品采集后需经0.45μm滤膜过滤预处理，过滤后应尽快分析。如果样品不能在24小时内测定，则应快速冷冻至-20℃保存，一般可存放2个月。样品融化后立即分析。
E.8.2在河口或近岸海域水体中，铜、砷和硅的浓度一般为较低，不会对活性磷酸盐测定产生干扰。高浓度的铁会引起沉淀并损失溶解态磷。水样如采自深海缺氧的盆地时，如有硫化物影响，鉴于含硫高的样品大多磷酸盐也高，一般可通过水样稀释处理即可消除干扰。
E.8.3测定过程中的所有实验用品，其磷酸盐的残留应很低，对样品和试剂无玷污。可用体积分数为10HCI清洗并用蒸馏水或去离子水冲洗干净。
E.8.4保证样品和试剂无颗粒物，如必要应先行过滤。30
附录F
（规范性附录）
流动注射比色法测定河口与近岸海水中溶解态硅酸盐
F.1适用范围和应用领域
本法适用于河口与近岸海水中溶解态硅酸盐的测定。
F.2方法原理
在酸性介质中，样品中的活性硅酸盐与钼酸盐溶液反应生成硅钼黄，硅钼黄被抗坏血酸溶液还原为硅钼蓝，测定波长为660nm或820nm，吸光值与样品中的活性硅酸盐含量成正比。海水与纯水的不同折射率可引起正误差，应进行相应的校正。
F.3试剂和标准溶液
F.3.1贮备溶液
F.3.1.1硫酸溶液（0.05mol/L）：缓慢将2.8ml分析纯浓硫酸加入到约800ml的纯水中，冷
却后稀释到1L。
F.3.1.2钼酸铵溶液（10g/L）：在约800ml硫酸溶液（0.05M）中溶解10.0g四水合钼酸铵（[NH4）6Mo7O24·4H2O]，并用硫酸溶液（0.05M）稀释到1000ml。用棕色塑料瓶贮存，可稳定约1个月，每次使用前检查，如瓶壁有白色沉淀出现或颜色变蓝时应重配。
F.3.1.3硅酸盐贮备液（100mgSi/L）：称取0.6696g六氟硅酸钠（Na2SiF6，105℃烘2h）于1L塑料容量瓶中（预先装有约800ml纯水），塑料薄膜密封后用涂特氟隆的转子搅拌至全溶解，一般需2~24h，用纯水准确定容至1L。装在塑料瓶里妥善保存，可稳定1年。
F.3.1.4无营养盐海水：采集天然低营养盐（<0.03mgSi/L）海水，0.45μm非玻璃滤膜过滤。
F.3.2使用溶液
F.3.2.1抗坏血酸溶液：在200ml纯水和12.5ml丙酮中溶解4.4g抗坏血酸（C6H6O6），用纯水稀释到250ml，在塑料瓶中4℃条件下可存放一周。溶液变棕色应重配。
F.3.2.2草酸溶液：在约800ml纯水中溶解50g草酸（H2C2O4·2H2O），稀释定容至1000m存放在塑料瓶中可稳定3个月左右。
F.3.2.3标准曲线系列：用纯水或无营养盐海水稀释相应体积的标准贮备液（F.3.1.3），准备一系列校准标准点。当天配制。校准曲线至少有五个浓度等梯度增加的标准点，浓度范围应不超过2个数量级，并包括实测样品浓度范围。
如样品的盐度变化范围很窄（±2之内），建议用无营养盐海水（F.3.1.4）稀释到相应盐度测定标准曲线。如无异常，可不用进行折射率修正。如样品的盐度范围较大，建议用纯水作标准曲线测定，再进行折射率校正计算。
F.3.2.4含盐硅酸盐标准：如果校准曲线溶液不与实际样品的盐度一致，必须准备一系列含盐硅酸盐标准以消除因溶液中离子强度不同导致比色计响应差异而引起盐误差。
F.4仪器及设备
F.4.1气体隔断连续流动自动分析系统
F.4.1.1自动进样器。
F.4.1.2硅酸盐分析模块。31
F.4.1.3蠕动泵。
F.4.1.4单色计或配有钨灯（380~800nm）的分光光度计，流动池折射率要低。
F.4.1.5计算机数据处理系统。
F.4.2玻璃器皿和用品
F.4.2.1全塑过滤系统，0.45μm非玻璃滤膜，塑料洗瓶、移液管，60ml聚乙烯塑料样品瓶和容量瓶。
F.4.2.2烘箱、干燥器和分析天平。
F.5校准与标准化
F.5.1当天的系统校准至少有5个标准系列点。
F.5.2每批次须新配系列校准曲线点，而每批次不超过60个样品。建议大批量样品分几批及其各自的标准曲线测试。
F.5.3测定每批次样品前，应先进行校准曲线的测试，各标准系列点平行测定。
F.5.4校准曲线不少于5个标准点，相关系数应等于或大于0.995。
F.6分析步骤
F.6.1冰冻样品应先在室温下解冻，分析前应充分混匀水样。
F.6.2开机预热30min。
F.6.3调整分析流程。
注：实验室应尽量恒温，室温的波动可能引起显色过程的反应动力学速度变化。分析模块应避开加热系统或空调机的气流。在船上等温度波动明显的情况，可加长混合圈使显色反应完全。
F.6.4设定合适的光度计测定波长。
注：硅钼蓝的吸收峰有两个820nm和660nm，因检测器工作范围为380~800nm，本法测定用660nm波长，也可达到满意的灵敏度。不过如有条件，820nm的灵敏度更好。
F.6.5根据样品的硅酸盐最高含量设定比色计的量程。
F.6.6准备所用试剂和标准。
F.6.7待测试系统达到稳定的基线。
测定盐度波动不大（±2之内）的样品时，建议采用与样品盐度接近的低营养盐海水代替纯水作载流。否则，用纯水作载流，同时进行校正。
F.6.8使用干净的样品杯，把标准曲线溶液、试剂空白、空白加标样、实验室基体加标样、质控样、待测样品分别放在取样架上，在每10个样品间放置一个空白。
F.6.9开始分析测试。
F.6.10分析结束后，泵入纯水清洗所有试剂管路。
注：在每天分析结束，通过经常性向进样管交替泵入纯水、1NHCl溶液、纯水、1NNaOH来清洗管路系尽量减少试剂基线的噪声。确认在1NNaOH泵入管路后用纯水清洗彻底，以免海水样进入后产生氢氧化镁沉淀。
F.7数据分析和计算
F.7.1活性硅酸盐浓度的计算通过标准曲线的回归方程求得，其中标准的浓度为自变量而相关的响应峰值为因变量。
F.7.2河口和近岸海水样品的盐误差校正。32
F.7.2.1当样品中的盐度与以纯水配制的标准溶液和载流有明显区别时，必须进行由于离子强度不同而影响显色反应的盐误差校正。
F.7.2.2代表性的盐误差校正计算如下：
F.7.2.3结果（以Si计）以mg/L或μg/L表示。
F.8注意事项
F.8.1样品采集后需经0.45μm非玻璃滤膜过滤预处理，过滤后应尽快分析。如果样品不能在24小时内测定，则应快速冷冻至-20℃保存。样品融化后立即分析。
F.8.2采自深海缺氧的盆地的水样如存在硫化物影响，可用溴氧化或酸化后用氮气吹扫加以去除。活性磷酸盐含量大于0.15mgP/L时会产生干扰，可在最后显色前用草酸加以消除干扰。氟化物含量大于50mgF/L时会产生干扰，用硼酸与氟离子配位加以减少干扰。
F.8.3测定硅酸盐时应避免使用硼硅酸玻璃器皿。样品瓶和容量瓶一般为聚乙烯塑料。
F.8.4测定过程中的所有实验用品，其硅酸盐的残留应很低，对样品和试剂无玷污。可用体积分数为10HCI清洗并用蒸馏水或去离子水冲洗干净。
